液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用(LC-MS)與液相-串聯(lián)質(zhì)譜(LC-MS-MS)都是實(shí)驗(yàn)室精密的檢測(cè)儀器,二者非常相似,但也有很大的區(qū)別,今天將這兩個(gè)進(jìn)行對(duì)比,分析兩者的區(qū)別與聯(lián)系。
LC-MS可以通過采集質(zhì)譜得到總離子色譜圖。由于電噴霧是一種軟電離源,通常很少或沒有碎片,譜圖中只有準(zhǔn)分子離子,因而只能提供未知化合物的分子量信息,不能提供結(jié)構(gòu)信息。很難用來做定性分析,可以用來定量分析。但單級(jí)MS如果不用軟電離源,而是EI之類的話,就有碎片峰,可以提供分子結(jié)構(gòu)信息。
LC-MS/MS采用串聯(lián)質(zhì)譜,既能得到分子離子峰,又有碎片離子峰,因而可以用來進(jìn)行定性和定量分析。
一個(gè)基本相似之處是:他們的應(yīng)用領(lǐng)域都適用于液相適用的領(lǐng)域。
質(zhì)譜的突出特點(diǎn)是:它本身是有質(zhì)量信息的,是可以靠這個(gè)質(zhì)量信息定性或提供定性的一些依據(jù)的(還需要其它的一些定性儀器)。其次,質(zhì)譜本身也有一個(gè)分離作用,就是按照質(zhì)量的分離,如果液相分離了一次,那LC-MS就分離了兩次,而LC-MS/MS就分離了三次,LC-MS3就分離了四次....(3級(jí)以上是離子阱質(zhì)譜的特點(diǎn))。
LC-MS和LC-MS/MS(或MSn)的區(qū)別是:
如果你關(guān)心的結(jié)果是你樣品中的主成分,而且是你已經(jīng)知道的目標(biāo)物,比如質(zhì)控、有機(jī)合成后看一下純品、部分的農(nóng)藥全分析工作、藥物合成中前導(dǎo)化合物的指導(dǎo)(合成一鍋就打一針看看合成得對(duì)不對(duì))等等,都可以用LC-MS。因?yàn)樗鼙阋耍僮饕埠芎?jiǎn)單。即使有些東西液相沒分開,但只要你關(guān)心的是主成分,影響都不大。通過調(diào)整一下液相條件,或做完掃描圖直接看提取離子圖,或做SIM都可以。這些領(lǐng)域用LC-MS/MS是大材小用,花這么多錢是浪費(fèi)。
而如果你關(guān)心的結(jié)果是:
(1)未知的東西,打一針LC-MS無法定性,需要更多的碎片信息;
(2)是混合物中的痕量成分。
那須用LC-MS/MS:LC-MS/MS可以給出需要更多的碎片信息,幫助你來定性;LC-MS/MS可以降低背景噪音,讓痕量組分的譜圖不受豐量物質(zhì)的干擾;LC-MS/MS可以降低很多背景噪音,使你的化合物的靈敏度大幅提高,定量結(jié)果變好。
做定量分析選LC-MS還是LC-MS/MS?
質(zhì)譜定量分析,使用的一般是LC-MS/MS,不使用LC-MS, 看一下質(zhì)荷比,推測(cè)下分子量。LC-MS中UV可以用來定量,但是在有紫外吸收的干擾峰的時(shí)候,定量是不準(zhǔn)的。LC-MS/MS使用母離子/子離子來進(jìn)行定量,相對(duì)來說,干擾要少的多,也比較準(zhǔn)確,在PK/TK的應(yīng)用很廣泛。
質(zhì)譜定量中已經(jīng)被廣泛接受的方式是MS/MS定量。這種定量常通過三級(jí)四極桿或離子阱質(zhì)譜實(shí)現(xiàn)。
要求使用MS/MS的原因是:許多化合物有同樣的質(zhì)量。當(dāng)使用第①個(gè)維度即單級(jí)質(zhì)譜MS去定量時(shí),也會(huì)缺乏特異性,尤其是對(duì)于像血液那樣的復(fù)雜的基質(zhì)。第二個(gè)維度的MS(即MS/MS)在大多數(shù)情況下,能夠提供唯①的斷裂。合并特異的母離子質(zhì)量和唯①的碎片離子信息,可以選擇性地監(jiān)測(cè)被定量的化合物。